肝ミクロソーム・その他
ヒト肝組織から調製したプールドミクロソーム（現在２ロット）、 プールド可溶性画分および核・ミトコンドリア・細胞膜画（現在１ロット）、個別ミクロソーム（現在２ロット）１．ヒト肝組織（由来）
【プールドミクロソーム】
- 10名の日本人
- P-Ms.20031218は40～70歳代（平均58歳）の男性（6名）と女性（4名）から提供された肝組織から調製
P-Ms.20060707は30～70歳代（平均57歳）の男性（5名）と女性（5名）から提供された肝組織から調製 - 手術摘出組織の凍結試料を調製時に解凍
- Ms.4799は70歳代の日本人男性、Ms.6670は60歳代の日本人男性から提供された肝組織から調製
２．調製法
３．分譲可能な試料
| 資源番号 | 資源名 | 容量 | 本数 |
|---|---|---|---|
| P-Ms.20031218 | プールドミクロソーム | 0.5ml/本 | 20本 |
| P-Sfr.20031218 | プールド可溶性画分 | 1.5ml/本 | 46本 |
| P-Nfr.20031218 | プールド核・ミトコンドリア・細胞膜 | 1.5ml/本 | 19本 |
| P-Ms.20060707 | プールドミクロソーム | 0.5ml/本 | 39本 |
| Ms.4799 | 個別ミクロソーム | 0.5ml/本 | 6本 |
| Ms.6670 | 個別ミクロソーム | 0.5ml/本 | 2本 |
４．ミクロソームの活性
| P-Ms.20031218 | P-Ms.20060707 | Ms.4799 | Ms.6670 | |
| タンパク濃度 (mg/ml) |
9.7 | 19.3 | 14.9 | 13.1 |
| P450比活性 (ng/mg protein) |
0.33 | - | - | - |
| 薬物代謝活性 (pmol/min/mg protein) |
||||
| CYP1A1/2 | 28.5 | 29.6 | 32.1 | 24.2 |
| CYP2A6 | 78.2 | 67.1 | 80.4 | 53.7 |
| CYP2B6 | 5.1 | 7.9 | 5.7 | 3.9 |
| CYP2C8/9 | 99.5 | 146.6 | 120.0 | 62.3 |
| CYP2C19 | 30.0 | 9.9 | 11.8 | 2.1 |
| CYP2D6 | 32.1 | 20.6 | 21.2 | 16.0 |
| CYP2E1 | 883 | 1187.6 | 717.2 | 1034.3 |
| CYP3A4 | 2920 | 1466.7 | 1039.1 | 815.1 |
CYP活性測定法 （HPLC使用）
| 1) CYP1A1/2 | ： 7-Ethoxyresorufin O-deethylase 活性 |
| 2) CYP2A6 | ： Coumarin hydroxylation 活性 |
| 3) CYP2B6 | ： 7-Benzyloxyresorufin debenzylase 活性 |
| 4) CYP2C8/9 | ： Tolbutamide methylhydroxylation 活性 |
| 5) CYP2C19 | ： S-Mephenytoin 4'-hydroxylation 活性 |
| 6) CYP2D6 | ： Debrisoquine 4-hydroxylation 活性 |
| 7) CYP2E1 | ： Chlorozoxazone 6-hydroxylation 活性 |
| 8) CYP3A4 | ： Testosteroen 6β-hydroxylation 活性 |
５．個別ミクロソームの多型解析
| SNPs | Ms.4799 | Ms.6670 | |
| 2C9 | 2(430C/T) | *1/*1 | *1/*1 |
| 3(1075A/C) | *1/*1 | *1/*1 | |
| 4(1076T/C) | *1/*1 | *1/*1 | |
| 5(1080C/G) | *1/*1 | *1/*1 | |
| 2C19 | 2(exon5/681G/A) | *1/*2 | *2/*2 |
| 3(exon4/636G/A) | *1/*1 | *1/*1 | |
| Phenotype | ヘテロEM | PM | |
| 2D6 | 2(2850C/T) | *1/*2 | *1/*2 |
| 3(2549A/del) | *1/*1 | *1/*1 | |
| 4(1846G/A) | *1/*1 | *1/*1 | |
| 5(2D6del) | *1/*1 | *1/*1 | |
| 10(100C/T) | *1/*10 | *1/*1 | |
ミクロソームの活性測定、多型解析は、創薬等HS総合研究班、小林英司（自治医大）班の分担研究者である絵野沢伸博士（国立成育医療センター研究所）と鈴木聡博士（HAB研究機構）により実施されました。